Выявление возбудителей респираторного комплекса крупного рогатого скота с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции

Abstract

Приведены результаты разработки и оценки диагностической эффективности тест-системы на основе мультиплексной полимеразной реакции для выявления возбудителей респираторного комплекса крупного рогатого скота. Установлено, что реакция осуществляется с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени с использованием синтетических олигонуклеотидных праймеров и зондов SEQ ID NO:1 – 28. Обратную транскрипцию для синтеза кДНК проводили непосредственно в ходе мультиплексной ПЦР. Исследование каждой пробы биологического материала осуществляли в двух независимых реакциях с целью обнаружения восьми вирусов (BPIV, BRSV, BHV-1, BHV-4, BCoV, BVDV1, BVDV2, BVDV3). При исследовании 115 проб биологического материала, отобранного от 23 телят в возрасте 2-4-х мес. с признаками респираторной патологии, было выявлено 56,5% положительных проб. В исследованных пробах внутренних органов выявили все анализируемые возбудители респираторного комплекса КРС, но чаще всего – BHV-4 и BHV-1, реже BVDV2 и BVDV3.